微生物限度檢查的疑問解答

三、微生物限度

1. 包裝材料的大腸埃希菌檢查？

答：根據包裝材料的不同，大腸埃希菌的檢查方法大致有兩種，一種是將浸提液合并后，取一部分，接種膽鹽乳糖培養基進行檢查；另一種是將浸提液合并后，薄膜過濾，然后按規定的方法檢驗。

2. 抗真菌藥品的微生物限度檢查法

答：這類產品的霉菌和酵母菌計數方法需要進行調整，可以根據產品劑型的不同，選擇薄膜過濾法或培養基稀釋法等方法。

3. 為什么在日常樣品檢測中還需要做陽性對照（國外不需要）？

答：為了確保每一次檢測對可能存在的微生物都是有效的。

4. 對于同一個品種，藥典為什么不規定統一的檢測方法？

答：本版藥典進行過這樣的嘗試，也有某些品種已經收載了統一的檢測方法，如注射用頭孢類抗生素的無菌檢查。之所以沒有大量收載，主要是由于檢測方法還沒有經過必要的復核。將微生物檢驗的統一方法收載在品種的各論項下，始終是努力的方向。

5. 梭菌檢查中需置厭氧條件下培養48小時，是否指在厭氧培養箱中？

答：需要在厭氧培養裝置中進行培養，未必一定是厭氧培養箱。

6. 控制菌檢查方法驗證時，采用多種方法均未檢出控制菌，如何處理？

答：在確保所使用的各種方法都沒有錯誤的情況下，如果仍無法使試驗菌生長，則應該采用薄膜過濾法進行檢查。理由是該方法能夠zui大程度地去除產品的抑菌作用。

7.常規的監督抽樣檢品（包括原料）在進行微生物限度檢查時，是否一定要進行活螨檢查并在原始記錄與報告書中體現？

答：需要進行檢查?？梢栽谠加涗浿畜w現，報告書上可以不出現，除非當發現有活螨檢出。

8. 藥包材微生物限度檢查規定了合格質量水平，通常產量下取樣8個，要求8個瓶子均符合規定，如何進行？

答：每個瓶子分別進行實驗。

9. 大腸埃希菌具體操作規程？

答：參見中國藥品檢驗標準操作規程。

10. 動物組織及動物類原藥材的提取物入藥，是否需要檢沙門菌？

答：需要進行沙門菌檢查。

11. 關于中國藥典菌落計數結果的判斷還存在疑義，望能舉例說明。

答：不清楚所指的存在疑義是指哪方面。2010年版對結果報告進行了較大篇幅的修訂，目前的規定應該比05版更為清晰、明確。

12. 需做沙門菌檢驗樣品量的確定？

答：10g（ml）用于樣品計數檢驗和其他控制菌檢查，10g（ml）用于沙門菌檢查，10g（ml）用于沙門菌檢查的陽性對照。需要進行沙門菌檢查的樣品，檢驗用量應為30g（ml）。

13. 日常的實驗室裝備能否達到梭菌無氧的培養要求？

答：*可以?？梢圆捎脜捬跖囵B盒（罐）。

14. 如果一個產品有兩個規格，是否可以取其中之一做陽性對照？

答：每個規格均需進行陽性對照。

15. 細菌數為100g/g的，樣品稀釋級只做1:10,1:100的倍數就可以了嗎？

答：可以。

16. 培養時間3天，5天，可理解為72小時，120小時嗎？

答：可以。這樣更為嚴謹。

17.中國藥品檢驗標準操作規范“已做驗證試驗的供試品，在檢查時刻不必再做陽性對照”如何理解？

答：該標準操作規范中在無菌檢查法中規定“供試品無菌檢查應進行陽性對照試驗”，表明不論是否進行了方法驗證，在產品的每一次檢驗過程中，還必須進行陽性對照。在控制菌檢查的大腸埃希菌項下，指出“已做驗證試驗的供試品，在該供試品檢查時不必再作陽性對照”。該規定僅適用方法驗證與供試品檢查同時開展的情況。2005年版藥典和2010年版藥典在控制菌檢查中均對陽性對照試驗有明確規定，“進行供試品控制菌檢查時，應做陽性對照試驗。”產品檢驗中應以藥典規定為準。

18. 無菌檢查和微生物限度檢查中，產品中規定的溶解液是否可以換成其他的溶液？

答：可以。

19. 制劑通則中，沒有微生物檢查項目的，是否可不進行微生物項目檢測？

答：可以。主要是二部制劑通則中口服片劑、膠囊劑、丸劑和顆粒劑。

20. 在細菌、霉菌和酵母菌計數中，適用性檢查細菌是培養48小時，霉菌和酵母菌是培養72小時，供試品檢查中細菌是培養3天，霉菌和酵母菌是培養5天，那方法驗證中應參照哪個時間進行培養。

答：應按照供試品檢驗時的條件，即細菌3天，霉菌和酵母菌5天。

21. 測定純化水微生物限度時，每張濾膜過濾量是多少合適？需要先稀釋嗎？過濾完后需不需要沖洗？假如我取10ml純化水通過雙杯體封閉式薄膜過濾器過濾，每張濾膜上的計數是以5ml為單位還是10ml為單位？

答：過濾量應以培養后出現的微生物數不超過100cfu/膜為標準。一般可不稀釋。不需要沖洗。每張濾膜的過濾量為5ml。